蒙藥地錦草總黃酮提取工藝如何研究?
??蒙藥地錦草總黃酮提取工藝研究?地錦草為大戟科植物地錦Euphorbiae?humifusae?willd.的干燥全草。具有止血、燥濕?"協(xié)日烏素"、愈傷、清腦、清脈熱的功能。用于便血、創(chuàng)傷出血、衄血、吐血、肺膿瘍、咯膿血痰、中風等。是蒙醫(yī)常用藥之一,如意至寶丸(額爾郭烏日勒)等方劑的主要藥。
??地錦草主要含槲皮素甙及素、山奈素甙及素、地錦草素等黃酮類化合物。其煎劑、醇提液及地錦草素均有抗菌、止血等作用。我們曾對地錦草水提取液、乙醇提取液及總黃酮液抗自由基作用進行研究,結(jié)果證明地錦草有很強的清除和抑制自由基的作用。為進一步研究其有效成分,探索地錦草總黃酮提取最適條件,為提取工藝提供信息,以總黃酮含量為考察指標,采用正交實驗等方法對地錦草總黃酮提取工藝進行了系統(tǒng)研究。
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1?材料與儀器
藥材由本院附屬醫(yī)院蒙藥制劑室提供,經(jīng)我院蒙藥系鑒定教研室鑒定。均為《中國藥典》1995版本品種Euphorbiae?humifusae?willd.的干燥全草。蘆丁對照品由中國藥品生物制品檢驗所提供,批號為080-9303,其它化學試劑均為AR級,實驗用水為亞沸提純水。
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日立557雙波長雙光束分光光度計,754分光光度計(上海三分廠),F(xiàn)A160電子天平(上海天平儀器廠),PHS-WI型智能酸度計(杭州萬達儀表廠)。
2?實驗方法
2.1?最大吸收波長及穩(wěn)定性考察:精密量取蘆丁對照品液和樣品液各5.0ml,分別置?25ml容量瓶中,加水至6ml,加5%NaNO2液1.0ml,放置6min,加10%Al(NO3)3試液1.0m?l,放置6min,加10%NaOH試液10ml,加水至刻度,搖勻,放置15min,以相應試劑作空白,于557雙光束/雙波長分光光度計上進行全波長掃描,最大吸收波長為λmax500nm,同時,在?500nm波長處進行時間掃描,結(jié)果顯示150min內(nèi)基本穩(wěn)定。
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2.1.2?標準曲線的制備:精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品10.0mg,加甲醇溶解,轉(zhuǎn)入50ml容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得對照品液(0.2mg/ml)。精密吸取該液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml,分別置25ml容量瓶中,加水至6ml,加5%NaNO2試液1.0ml,放置6min,加10%Al(NO3)3試液1.0ml,放置6min,加1?0%NaOH試液10ml,加水至刻度,搖勻,放置15min以相應試劑作空白,于500nm處測定吸光度。
??以濃度(C)與吸光度(A)進行直線回歸,得回歸方程為Y=0.0209+0.3467X,γ=0.9?997。在0.20~1.20mg范圍內(nèi)呈線性關系。
2.1.3?加樣回收率測定:稱取5.0g地錦草粗粉3份,精密稱定,分別精密加入蘆丁對照品,按樣品制備法制備,并照標準曲線制備方法測定,計算其回收率。
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